Полная версия

Главная arrow Медицина

  • Увеличить шрифт
  • Уменьшить шрифт


<<   СОДЕРЖАНИЕ ПОСМОТРЕТЬ ОРИГИНАЛ   >>

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ И ЦИТОКИНОВЫЙ ПРОФИЛЬ ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ЛОКАЛЬНОЙ И ОБЩЕЙ ВИБРАЦИИ

Результаты обширных иммунологических исследований позволили установить, что иммунная система одной из первых реагирует на различные неблагоприятные факторы производственной среды и, следовательно, является важнейшей составляющей в комплексе компенсаторно-приспособительных механизмов, обусловливающих адаптацию организма в целом.

При вибрационной болезни достаточно хорошо изучены изменения нервной и эндокринной систем, однако исследования, посвященные оценке иммунной системы при вибрационной болезни, ее клеточного звена и цитокинового статуса носят единичный и достаточно противоречивый характер.

Общепризнано, что в клинической картине вибрационной болезни наиболее значимыми являются нейрососудистые нарушения, среди которых особое место занимают расстройства периферического кровообращения, наступающие первично в капиллярном и прекапилляр- ном русле. Гипоксия и расстройства микроциркуляции способствуют активации клеток крови, которые начинают выделять вазоактивные вещества — цитокины. Цитокины противовопалительного действия способствуют прогрессированию гипертрофии миокарда, ремоделированию сосудистого русла.

Таким образом, целью нашего исследования явилось изучение состояния клеточного звена иммунитета и цитокинового профиля при вибрационной болезни от воздействия локальной и общей вибрации, в том числе в зависимости от степени тяжести заболевания.

Обследовано 84 человека с различными формами и степенью тяжести вибрационной болезни.

  • 1 группу составили 17 человек с первой степенью вибрационной болезни от воздействия локальной вибрации;
  • 2 группа — 23 человека со второй степенью вибрационной болезни от воздействия локальной вибрации;
  • 3 группа — 18 человек с первой степенью вибрационной болезни от воздействия общей вибрации;
  • 4 группа — 26 человек со второй степенью вибрационной болезни от воздействия общей вибрации;

в 5 группу — контрольную — вошли 30 человек — работники промышленных предприятий и учреждений, не имевшие в процессе работы контакта с профессиональными вредностями, без признаков поражения сердечно-сосудистой и нервной системы, поданным комплексного обследования признанные здоровыми.

Критерии включения — установленный диагноз вибрационной болезни от воздействия локальной или общей вибрации, возраст от 35 до 60 лет.

Критерии исключения — возраст старше 60 лет и моложе 35 лет, онкологические заболевания, выраженные метаболические нарушения, сахарный диабет, ожирение, сопутствующая бронхолегочная патология, наличие выраженных иммунодефицитных состояний.

Диагноз вибрационной болезни (вид вибрации, степень, клинические особенности неврологических и периферических сосудистых расстройств) устанавливался в соответствии с перечнем профессиональных заболеваний, утвержденным приказом Министерства здравоохранения и социального развития РФ от 27 апреля 2012 года № 417н «Об утверждении перечня профессиональных заболеваний», на основании данных профессионального анамнеза, санитарно-гигиенической характеристики условий труда (работа в контакте с локальной (или общей) вибрацией в уровнях, превышающих ПДУ, свыше 15 лет), полного клинико-функционального обследования больных, включая методы неврологического исследования (определение порогов вибрационной чувствительности, альгезиметрия, термометрия, динамометрия, капилляроскопия, проба белого пятна).

Больные вибрационной болезнью от воздействия локальной вибрации были представлены такими профессиями, как клепальщики, полировщики, обрубщики. Больные с вибрационной болезнью от воздействия общей вибрации были представлены водителями большегрузной техники, механизаторами сельскохозяйственных предприятий.

Показатели иммунного статуса определяли в соответствии с рекомендациями ВОЗ и Института иммунологии ФМБА России. Методы иммунологического исследования включали определение субпопуляций лимфоцитов с помощью моноклональных антител серии ЛТ (Институт иммунологии ФМБА России). Вычисляли процент общей популяции клеток, экспрессирующих CD4+, CD8+, CD 16+ лимфоцитов. Одновременно проводили клинический анализ крови для определения абсолютного количества клеток.

Уровни цитокинов ИЛ-ip, ИЛ-4, ИЛ-8 в сыворотке крови определяли с помощью твердофазного иммуноферментного анализа. Определение содержания фактора некроза опухолей альфа (ФНО-а) в сыворотке крови осуществлялось при помощи набора реагентов BMS223/4 фирмы «eBioscience» иммуноферментным методом на планшетном фотометре-анализаторе Expert Plus (Biochrom, Великобритания).

Результаты исследования регуляторных Т-лимфоцитов свидетельствуют, что у больных вибрационной болезнью от воздействия локальной или общей вибрации имеет место достоверное снижение хелпер- ной (CD4+) и супрессорной (CD8+) субпопуляций лимфоцитов в сравнении с контрольной группой.

Так, при исследовании показателей иммунного статуса у обследованных больных было выявлено снижение абсолютного и относительного количества клеток, экспрессирующих CD4+ рецептор. При этом наиболее выраженное снижение абсолютного числа С04+лимфоцитов наблюдалось при второй степени вибрационной болезни от воздействия локальной вибрации 0,87±0,03 (р < 0,001), что, по-видимому, может быть обусловлено длительностью воздействия локальной вибрации. В меньшей степени снижение абсолютного числа CD4+ лимфоцитов наблюдалось при первой степени вибрационной болезни от воздействия локальной вибрации 0,89+0,04 (р < 0,01) и при первой степени вибрационной болезни от воздействия общей вибрации 0,88±0,03 (р < 0,01). При второй степени вибрационной болезни от воздействия общей вибрации достоверность различий с контрольной группой еще менее выражена и составляет 0,93±0,03 (р < 0,05). Относительное число CD4+ лимфоцитов достоверно снижено во всех группах больных как при воздействии локальной вибрации, так и локальном общей вибрации (р < 0,001).

Абсолютный уровень клеток, экспрессирующих CD8+ рецептор (клеток с супрессорной активностью), достоверно снижен при второй степени вибрационной болезни от воздействия локальной вибрации 0,37±0,02 (р < 0,001), а также снижен при первой и второй степени вибрационной болезни от воздействия общей вибрации (р < 0,001). Относительный уровень С08+-лимфоцитов снижен при второй степени вибрационной болезни от воздействия локальной вибрации, а также при воздействии общей вибрации (р < 0,001). Известно, что Т-хелперы (CD4+) являются основными регуляторными клетками иммунного ответа, которые регулируют направление иммунного ответа и его эффективность. Низкий уровень Т-хелперов (CD4+) является основной причиной наличия иммунной недостаточности обследованных лиц.

Соотношение CD4+/CD8+ (иммунорегуляторный индекс) достоверно повышено только в группе больных с вибрационной болезнью второй степени от воздействия общей вибрации 3,29±0,26 (р = 0,001) по сравнению с контрольной группой. В группах больных с первой степенью вибрационной болезни от воздействия общей вибрации и при первой и второй степени вибрационной болезни от воздействия локальной вибрации достоверных различий иммунорегуляторного индекса с группой контроля выявлено не было.

Определение количества натуральных киллеров (CD 16+) также имеет важное значение в оценке иммунного профиля больных вибрационной болезнью от воздействия локальной и общей вибрации. Абсолютное число клеток, экспрессирующих CD 16+ рецептор, вне зависимости от степени вибрационной болезни и вида воздействующей вибрации, достоверно не отличалось от показателя контрольной группы. Относительный уровень CD 16+ лимфоцитов (Т-киллеров) был достоверно снижен при второй степени вибрационной болезни от воздействия локальной вибрации (р < 0,05), первой степени вибрационной болезни от воздействия общей вибрации (р < 0,05), второй степени вибрационной болезни от воздействия общей вибрации (р < 0,01). Показатели иммунного исследования показателей клеточного иммунного статуса у обследованных больных вибрационной болезнью представлены в таблице 2.

Показатели иммунного статуса у обследованных больных и контрольной группы

Таблица 2

Показа

тели

Контроль

(л = 30)

ВБ первой степени от воздействия локальной вибрации (л = 17)

ВБ второй степени от воздействия локальной вибрации (л = 23)

ВБ первой степени от воздействия общей вибрации (л = 18)

ВБ второй степени от воздействия общей вибрации (л = 26)

Лейкоциты

*109

5,7±0,25

6,13±0,35

6,02±0,32

6,66±0,38

5,97±0,25

Лимфоциты,%

31,43±0,99

28,65±1,43

29,00±1,07

27,72±1,28

31,19±1,35

Сб4+лц

1,10±0,06

0,89±0,04* *

0,87±0,03* * *

0,88±0,03**

0,93±0,03*

CD4+,%

45,17±0,59

41,12±0,75***

40,52±0,43***

40,61 ±0,64* * *

40,73±0,42***

Сб8+лц

0,1 ±0,04

0,53±0,03

0,37±0,02***

0,37±0,02***

0,31 ±0,02***

CD8+,%

26,43±0,44

27,06±0,16

24,22±0,32***

23,72±0,45* * *

20,35±0,32***

С016+ЛЦ

0,21 ±0,02

0,20±0,01

0,19±0,01

0,20±0,01

0,20±0,01

CD16+,%

22,90±0,34

20,94±0,66

18,57±0,48*

18,83±0,61*

17,62±0,49* *

CD4+/ CD8+

2,16±0,24

1,78±0,14

2,58±0,23

2,56±0,19

3,29±0,26* * *

Примечание:

  • * — достоверность различий показателей с группой контроля (р < 0,05)
  • ** — достоверность различий показателей с группой контроля (р < 0,01) *** — достоверность различий показателей с группой контроля (р < 0,001)

При исследовании цитокинового статуса у пациентов с вибрационной болезнью от воздействия локальной и общей вибрации (при первой и при второй степени заболевания) было выявлено изменение концентраций провоспалительных и противовоспалительных цитокинов. Показатели цитокинов у обследованных больных и контрольной группы представлены в таблице 3.

В исследовании выявлено достоверно значимое повышение концентрации ФНО-а у больных с вибрационной болезнью независимо от вида воздействующей вибрации.

При первой степени вибрационной болезни от действия локальной вибрации концентрация ФНО-а составила 7,48±0,13 пг/мл, (р < 0,001); при второй степени вибрационной болезни от действия локальной вибрации концентрация ФНО-а составила 7,40±0,19 пг/мл, (р < 0,001).

В группе пациентов с вибрационной болезнью первой степени от действия общей вибрации концентрация ФНО-а составила 7,40+0,15 пг/мл, (р < 0,001); при второй степени вибрационной болезни от действия общей вибрации концентрация ФНО-а — 7,86+0,19 пг/мл, (р < 0,001).

ФНО-а — цровоспалительный цитокин, продуцируемый моноцитами, макрофагами. Повышение концентрации ФНО-а может быть обусловлено стимуляцией макрофагальной защиты организма при воздействии производственной вибрации как фактора повреждения, независимо от вида вибрации, но более выраженное при второй степени вибрационной болезни от действия общей вибрации.

При определении провоспалительного цитокина ИЛ-8 у больных с вибрационной болезнью было отмечено статистически достоверное повышение концентрации исследуемого цитокина при воздействии как локальной, так и общей вибрации.

При первой степени вибрационной болезни от воздействия локальной вибрации выявлено более значимое повышение концентрации ИЛ-8 до 61,71 ± 1,77 пг/мл, (р < 0,001), чем при второй степени вибрационной болезни от воздействия локальной вибрации, когда уровень ИЛ-8 составил 21,30±0,66 пг/мл, (р < 0,001). При первой степени вибрационной болезни от воздействия общей вибрации концентрация ИЛ-8 повышена в 3,8 раза и составила 60,50+0,63 пг/мл, (р < 0,001). При второй степени вибрационной болезни от воздействия общей вибрации отмечено увеличение концентрации ИЛ-8 в 5,3 раза по сравнению с контролем и равно 84,38± 1,06 пг/мл, (р < 0,001). При воздействии локальной вибрации у больных были определены статистически значимые изменения уровня ИЛ-8.

Такое повышение содержания провоспалительных цитокинов (ФНО-а, ИЛ-8) у больных вибрационной болезнью от воздействия локальной или общей вибрации свидетельствует об активации процессов воспаления, в механизмах индуцирования которого, возможно, играет роль как гипоксия периферических тканей, связанная с нарушением в них кровоснабжения и метаболических процессов, так и изменения первичное изменение реактивности иммунной системы у больных вибрационной болезнью от воздействия локальной и общей вибрации.

При определении концентрации ИЛ-1|3 в крови пациентов с вибрационной болезнью статистически достоверно выявлено повышение концентрации исследуемого цитокина во всех группах больных вибрационной болезнью по сравнению с контролем. При этом наиболее выраженное увеличение концентрации ИЛ-ip было отмечено при воздействии общей вибрации.

ИЛ-ip в основном продуцируется макрофагами и фагоцитами, а также лимфоцитами, фибробластами, эпителиальными клетками. ИЛ-ip инициирует и регулирует воспалительные, иммунные процессы, активирует нейтрофилы, Т-лимфоциты и В-лимфоциты, стимулирует синтез белков острой фазы, других цитокинов, молекул адгезии, простагландинов.

ИЛ-ip повышает хемотаксис, фагоцитоз, гемопоэз, проницаемость сосудистой стенки, обладает пирогенными свойствами, запускает реакции воспалительно-регуляторного каскада, стимулирует синтез коллагена, играет важную роль в развитии местного воспалительного процесса.

При первой степени вибрационной болезни от воздействия локальной вибрации концентрация ИЛ-ip составила 47,59±1,70пг/мл, (р < 0,001); при второй степени вибрационной болезни от воздействия локальной вибрации концентрация ИЛ-1|3 составила 93,22±1,72 пг/мл,

(р < 0,001).

При первой степени вибрационной болезни от воздействия общей вибрации концентрация ИЛ-1р составила 246,22±9,25 пг/мл, (р < 0,001); при второй степени вибрационной болезни от воздействия общей вибрации концентрация ИЛ-ip составила 478,19+18,09 пг/мл, (р < 0,001). Таким образом, выявлено более значимое повышение концентрация провоспалительного цитокина ИЛ-1р при воздействии общей вибрации, что может быть обусловлено большей площадью поверхности тела, контактирующей с вибрацией и, соответственно, реакцией иммунной системы, ее афферентного звена.

При исследовании уровня противовоспалительного цитокина ИЛ-4 в сыворотке крови было выявлено достоверно значимое снижение его концентрации во всех группах больных по сравнению с контрольной группой. Более значимое снижение показателя ИЛ-4 отмечено у пациентов с вибрационной болезнью от воздействия общей вибрации. При первой степени вибрационной болезни от воздействия общей вибрации показатель ИЛ-4 снижен в 1,3 раза по сравнению с контролем и составил 19,67+0,30 пг/мл, (р < 0,001); при второй степени вибрационной болезни от воздействия общей вибрации показатель ИЛ-4 снижен в 1,5 раза и составил 17,38±0,22 пг/мл, (р < 0,001).

Таким образом, снижение концентрации ИЛ-4 в крови у пациентов с вибрационной болезнью может быть обусловлено снижением иммунологической реактивности организма в ответ на вибрационное воздействие, более выраженное у больных с длительным стажем работы в контакте с общей вибрацией при второй степени вибрационной болезни. Также возможно, что данные изменения (снижение ИЛ-4) возникают компенсаторно и связаны с активностью воспалительного процесса (увеличением провоспалительных цитокинов).

Таблица 3

Показатели цитокинов у обследованных больных и контрольной группы

Группа

ФНО-а

пг/мл

ИЛ-8

пг/мл

ИЛ-1Р

пг/мл

ИЛ-4

пг/мл

ВБ первой степени от воздействия локальной вибрации (л = 17)

7,48±0,1 з* * *

61,71 ±1,77* * *

47,59±1,70***

20,88±0,84* * *

ВБ второй степени от воздействия локальной вибрации (п = 23)

7,40±0,19* * *

21,ЗОЮ,66***

93,22±1,72* * *

21,30±0,23* * *

ВБ первой степени от воздействия общей вибрации (п = 18)

7,40±0,15* * *

60,50±0,63* * *

246,22±9,25* * *

19,67±0,30* * *

ВБ болезнь второй степени от воздействия общей вибрации (п = 26)

7,86±0,19***

84,38±1,06* * *

478,19±18,09***

17,38±0,22***

Контроль(п = 30)

2,63±0,08

16,05±1,01

30,73±0,47

26,27±0,48

Примечание:

  • * —достоверность различий показателей с группой контроля (р < 0,05)
  • ** — достоверность различий показателей с группой контроля (р < 0,01) *** — достоверность различий показателей с группой контроля (р < 0,001)

Таким образом, определено изменение показателей клеточного иммунитета (снижение показателей CD4+, CD8+, CD 16+) при вибрационной болезни от воздействия как локальной, так и обшей вибрации.

Также выявлены изменения цитокинового статуса при вибрационной болезни от воздействия как локальной, так и общей вибрации (повышение уровня провоспалительных цитокинов ФНО-а, ИЛ-8, ИЛ-ф), снижение уровня противовоспалительного цитокина (ИЛ-4). При этом выявленные изменения зависят от вида действующей вибрации и степени тяжести заболевания.

Таким образом, выявленные показатели клеточного иммунитета, цитокинов как провоспалительной, так и противовоспалительной направленности у больных с вибрационной болезнью от воздействия как локальной, так и обшей вибрации, могут свидетельствовать о наличии иммунологического, в том числе цитокинового дисбаланса при воздействии производственной вибрации. При этом выявленные изменения дополняют наши знания по патогенезу вибрационной болезни, вкладу иммуннологических факторов в ее развитие и прогрессирование (при изложении данной главы монографии использованы результаты исследований, выполненных на кафедре профессиональных болезней и клинической фармакологии ГБОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет» М3 РФ, Бараева Р.А., Бабанов С.А., 2015).

 
<<   СОДЕРЖАНИЕ ПОСМОТРЕТЬ ОРИГИНАЛ   >>