Консервирование и хранение проб фитопланктона.

Для консервирования и предохранения фитопланктона от разрушения при длительном хранении используются разнообразные химические соединения и их смеси.

Консервируют пробы сразу после их отбора путем добавления к ним фиксирующего реагента. Поскольку ни один из применяемых фиксаторов не может быть предпочтительным, важно учитывать достоинства и недостатки каждого из них при использовании в повседневной работе. Ниже приводятся прописи фиксирующих растворов, взятых из ряда методических руководств (Методика изучения биогеоценозов..., 1975; Федоров, 1979; Топачевский, Масюк, 1984).

Хорошую сохранность водорослей обеспечивает раствор формальдегида и хромовых квасцов (1 мл 4-процентного формальдегида и 10 г KCr(S0₄)₂ • 24Н₂0 в 100 мл пробы). Такие пробы могут сохраняться достаточно долго без заметного разрушения клеток фитопланктона. Исключение составляют жгутиковые водоросли, нежные клетки которых после фиксации формалином довольно быстро разрушаются.

Раствор люголя является хорошим фиксатором. Его используют, если количественная обработка проб осуществляется не позже трех месяцев с момента фиксации проб. При его употреблении в пробах хорошо сохраняются нежные формы фитопланктона. Кроме того, использование этого фиксатора позволяет (благодаря контрастированию препарата йодом) обнаруживать пиреноиды, жгутики, слизь и чехлы вокруг клеток. Фиксированные пробы необходимо хранить в темноте. Для приготовления раствора люголя берут 15 г KJ и растворяют в 50 мл дистиллированной воды, добавляют 10 г кристаллического йода и доводят раствор дистиллированной водой до общего объема 500 мл. Расход фиксатора на 100 мл пробы составляет 2 мл.

Раствор люголя и ацетата натрия способствует контрастированию просматриваемого под микроскопом препарата, что особенно важно при наличии в пробе мелких жгутиковых водорослей. Пробы, фиксированные данным препаратом, хранятся не более трех месяцев. Для приготовления фиксатора берут 10 г KJ, растворяют его в 70 мл дистиллированной воды, затем добавляют 5 г кристаллического йода и 5 г ацетата натрия (CH₃COONa). Для фиксации 100 мл пробы используют 0,2 мл такого раствора.

Раствор люголя с уксусной кислотой удлиняет срок сохранности фиксируемой пробы до одного года. Однако подкисление проб приводит к разрушению нежных водорослей и растворению оболочек некоторых жгутиковых. Для приготовления фиксатора берут 20 г KJ и растворяют в 200 мл дистиллированной воды, добавляют 10 г кристаллического йода и 20 г уксусной кислоты (СН₃СООН). Для фиксации 100 мл пробы используют 1 мл такого раствора.

Раствор люголя с хромовой кислотой позволяет достаточно «мягко» фиксировать фитопланктон и в то же время достаточно долго сохранять водоросли. Использование хромовой кислоты влечет уплотнение клеток, а уксусный, наоборот, приводит к их разбуханию. Данный фиксатор не растворяет слизистые оболочки водорослей, сохраняет и оттеняет жгутики и пиреноиды и незначительно деформирует нежные формы.

Существует еще один фиксатор. Он состоит из двух растворов, которые готовят раздельно, а потом сливают и хранят в темной склянке. Раствор № 1: 10 г KJ, 50 мл дистиллированной воды и 5 г кристаллического йода. Раствор № 2: 5 мл 1-процентной хромовой кислоты, 10 мл ледяной уксусной кислоты, 80 мл 40-процентного формальдегида. Сначала в пробу добавляют 1—2 капли фиксатора, а через 2—3 ч доводят концентрацию до цвета темного чая (Кузьмин, 1975).

Раствор Кифа является мягким фиксатором и надежно сохраняет нежные формы фитопланктона от разрушения. При низкой температуре в темноте пробы могут храниться до трех лет, а при комнатной температуре — до 6—8 месяцев. Для приготовления раствора Кифа используют 900 мл 50-процентного этанола, 50 мл 40-процентного формальдегида, 25 мл глицерина, 100 г СиС1₂ и 15 г уранилнитрата. Для фиксации 100 мл пробы в нее добавляют 5 мл раствора Кифа.

Все консервированные пробы фитопланктона независимо от использованного фиксатора необходимо хранить в плотно закрытых сосудах в затемненных местах при сравнительно низких температурах.